発明情報

適用分野・用途

• 生細胞へのタンパク質導入試薬・キット
• 細胞内可視化、細胞活性測定用試薬
• 抗体医薬品・バイオ医薬品等の細胞内活性評価のための試薬

発明概要と利点

本発明は、バイオプローブ等の物質を細胞質内に導入することが可能なペプチドである。
細胞内の特定の分子やタンパク質を認識する物質を利用したバイオプローブやバイオセンサーは、病態解析や薬物スクリーニング等にとって非常に重要なツールである。しかし、バイオプローブを機能させるためには、エンドサイトーシスで取り込まれたプローブ分子を高効率に細胞質に放出させることが必要である。そこで、pH感受性の膜損傷ペプチドや高分子を利用する手法が考えられてきたが、細胞内可視化や細胞活性測定に十分なエンドソームからの効率放出が得られないと言う問題点があった。

細胞表面での膜傷害性は低いが、細胞内に取り込まれた後のエンドソーム内の環境で膜傷害性を発揮するペプチドを開発した。
本発明のペプチドを用いて、10 kDaのデキストラン(高分子薬物モデル)の細胞質への放出を、50%以上の細胞で達成出来る。また、小型タンパク質では、ほぼ100％の細胞で、細胞質への放出に成功している。

本発明のペプチドを用いれば、バイオプローブや抗体を効率的に細胞質内に導入させることが可能となる。

Advantage

• 抗体(～150 kDa)の細胞質内への放出を確認している。
• 小型タンパク質ではほぼ100%の細胞で、細胞質への放出を達成している。
• 抗体の細胞内送達において、既存の製品よりも本発明の方が効果的な細胞内拡散を確認している。

本発明のペプチドを用いた導入法